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《联邦调查局：通缉要犯部》是《联邦调查局 FBI》的第一部衍生剧，与它不同的是，本剧是借由已知的嫌犯去追查行凶动机与动向。以FBI的逃犯特遣队为中心，经验丰富的特工Jess LaCroix(朱利安·麦克马洪 饰)监督着这支技术高超的团队，旨在追踪和抓捕FBI通缉名单上臭名昭著的逃犯。
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飞机失事导致Lexie Gray丧生，Mark Sloan也在被救援后因坠机导致的重伤而死亡。几个月后，西雅图的医生们必须调整心态去适应生活的巨大改变。历经空难事件后的Cristina Yang选择重新开始，离开了西雅图到明尼苏达州的梅奥医院任职。随着一组新的实习生的到来，新同事和主治医生们逐渐适应了他们的角色。